واحد درایو MB-D

- این واحد درایو براحتی روی میکرو مانیپولاتور نصب می شود و دارای دوام و عملکرد زیادی است.

- این واحد درایو جدید و بهبود یافته، PMM4G را قادر می سازد تا تزریق به آرامی و با دقت زیاد انجام پذیرد.

نمایشگر رنگی لمسی TS-1

- نمایشگر رنگی لمسی، تنظیمات و حالت های مختلف را نمایش می دهد.

- PMM4G بر اساس معلومات جدید و درک بسیاری از برنامه های توسعه یافته برای هر دو گروه متخصصین و مبتدیان طراحی شده است.

کنترلر PMM4G

- واحد کنترلر PMAS-CT4G ، کوچک شده واحد قبلی PMAS-CT150 می باشد. 

- این واحد جدید قابل استفاده و هماهنگ با واحد قبلی OP-15 برای  PMM-150HJ/ FU  می باشد. که مجموعا" دارای عملکرد صرفه جوئی در انرژی می باشد.

- از آنجا که این دستگاه دارای  کارایی ویژه است تقاضای زیادی در سراسر جهان برای مانیپولاسیون جنینهای پستانداران برای آن وجود دارد . عمومیت و دقت pmm میتواند با کاربرد های متفاوت ارتقاء داده شود .

در توضیخات زیر به چند مورد از کارکردهای معمول pmm اشاره شده است :

●سوراخ کردن پرده های زونا  و غشای سلولی

PMM 150 FUIHJ  ICSI-PIEZO  : دارای 2 شرایط حرکتی متفاوت است ، که عبارتند از شدت (قدرت) و سرعت عملکرد PIEZO 

استفاده از دو شرایط متفاوت در زمانبندی قدرت و سرعت مجزا میتواند پرده های اطراف زونا و غشای سلولی را سوراخ نماید

این مهمترین نکته در روش استفاده از PIEZO است . علاوه بر این بی حرکت کردن اسپرم نیز با عملکرد PIEZO به دست می آید .

►انتقال هسته / انتقال سلول و خارج کردن : (نوک مسطح در حدود 10-12 μm  OD  همانند ICSI با استفاده از دو تنظیم مجزا در زمانبندی ، قدرت و سرعت میتواند پرده های اطراف زونا و غشای سلولی را سوراخ نماید .

سیستم PMM  در آزمایشگاههای تحقیقاتی به عنوان بهترین و آسانترین سیستم معرفی شده است .

►ES-تزریق سلولی (نوک پهن در حدود 20-25 μm

اخیرا" تعداد مراکز تحقیقاتی که سیستم pmm در آنها برای موش و ... استفاده میشود رو به افزایش است و عملکرد piezo در مورد بلاستویست از عملکرد آن در مورد piezo icsi  متفاوت است .

نوک پیپت تنها توسط piezo میتواند در بلاستویست نفوذ نماید . این روش محبوبیت زیادی را در سراسر جهان همانند piezo icsi کسب کرده است .

►بیوپسی : روشهای تحقیقاتی روز به روز اشتقاق بیشتری حاصل میکنند . تکنیک و روش میکرو مانیپولاسیون نیز به طور مشابهی متفاوت میشود . این امکان وجود دارد که همچنین با پیپتهایی با قطر بزرگ عمل نمود . بعد از اینکه ورود به پرده های زونا انجام میشود بلاستومر میتواند با پیپت مشابهی برداشته شود .

►انتقال GV –انتقال پیش هسته ای : در این مانیپولاسیون ما از PMM  استفاده میکنیم که هسته  GV و پیش هسته را با یک پیپت با قطر خارجی بزرگ بیرون میکشد .

چرا سیستم piezo برای انجام icsi مناسب است ؟

نکته 1 : میکرو پیپت با نوک مسطح

در piezo – icsi   پیپتی که استفاده میشود به صورت مسطح پردازش شده است . چنین پیپتهایی مزایایی دارند به عنوان مثال از آنجا که نوک این پیپتها تیز نیستند احتمال آسیب احتمالی در اثر بی دقتی به غشای پلاسمایی کمتر است . علاوه بر این برداشتن اسپرم با چنین پیپتی آسان است . پیپت می تواند حتی به اندازه سر اسپرم نازک شود و به علت شکل ساده نوک پیپت ساختن چنین پیپتهایی بسیار آسان است .

نکته 2 : در مانیپولاسیونهایی که از pmm استفاده میشود شما میتوانید به صورت مجزا به پرده های اطراف جنین و غشای پلاسمایی نفوذ کنید و برای شکستن غشای سیتو پلاسمی نیازی به مکش سیتو پلاسم به داخل پیپت ندارید و مهارت شما با سیستم pmm  در تکنیک icsi بسیار بالا خواهد رفت .

پیپت تزریقی بدون ایجاد تغییر شکل در اوویست تنها از میان پرده های اطراف جنینی عبور میکند .

شما میتوانید با اطمینان غشای پلاسمایی را تنها با فشار یک دکمه pmm بشکنید .

●روشهای سنتی icsi

اوویستها با یک پیپت نوک تیز تغییر شکل می یابند و هیچ انتظاری از سرعت و دقت در شکستن غشای پلاسمایی وجود ندارد .

نکته 3 : عاری بودن از جیوه

ممکن است شما تصور کنید که شما باید از جیوه در piezo icsi استفاده کنید ، این تنها تصور شماست جیوه برای این سیستم مناسب نیست ما پیشنهاد میکنیم که به جای جیوه از فلورینات FC-77   به عنوان بهترین ابزار برای دستکاریهای PMM استفاده نمایید .

روش استفاده از فلورینات FC-77  توانایی نفوذ کافی و توانایی غیر متحرک کردن اسپرم را به دنبال دارد .

● تزریق هسته با PMM

تزریق هسته تقریبا" مشابه روش PIEZO –ICSI   است .

مرحله 1 : مکش هسته دهنده

♦پیپت به داخل سلول دهنده حرکت داده می شود .

♦هسته های انتقالی به داخل کشیده میشوند .

♦هسته های انتقالی از ماده سیتوپلاسمی دور نگه داشته میشوند ،در این هنگام از پیپت تزریقی استفاده میشود که قطر آن نازکتر از سلول دهنده است .

مرحله 2 : نفوذ به پرده های لقاحی زونا

موقعیت نفوذ تقریبا" مشابه روش PIEZO-ICSI است .

♦پیپت به آرامی در مقابل پرده های زونا قرار میگیرد و PMM فعال میشود .

♦هنگامی که ⅕ میکروپیپت داخل غشای زونا فرو رفت میکرومانیپولاتور حرکت کرده و پیپت شروع به حرکت مینماید .

مرحله 3 : نفوذ به غشاء

♦غشای پلاسمایی تا جایی که ممکن باشد توسیع می یابد .

♦یک تک پالس ضعیف PMM غشای پلاسمایی را میشکند .

مرحله 4 : تزریق هسته های انتقالی

♦هسته های انتقالی به عملکرد اینجکتور به سیتو پلاسم انتقال میابند .در این زمان تنها هسته های انتقالی در میکروپیپت وجود دارند و تا حد ممکن ماده دیگری نباید وارد شود .

♦پس از اینکه هسته های انتقالی به داخل لوویست تزریق شدند پیپت به آرامی از لوویست خارج میگردد .

به خاطر داشته باشید که این عمل نیازمند تمرین و تکرار زیاد است. 

● تزریق سلول ES به بلاستویست با PMM

همانطور که میدانید پیپت با نوک تیز به طور عمومی در تزریق معمول سلولهای ES به کار میرود .

گاهی اوقات پیپت میتواند به ICM آسیب وارد سازد . در تکنیک PMM تزریق سلولهای ES به بلاستویست میتواند از طریق یک پیپت با نوک مسطح همانند PIEZO-ICSI صورت گیرد .این کار مزایای بسیار زیادی برای جنین و کاربر دارد .

● مراحل مانیپولاسیون PMM

مرحله 1 : جنین با پیپت نگهدارنده نگه داشته میشود ، در این زمان موقعیت ساعت 9  برای پیپت نگهدارنده بهترین حالت است .

از آنجا که نوک پیپت تیز نیست وارد کردن پیپت به ناحیه اتصالی سلول امکانپذیر نیست .

مرحله 2 : پیپت تزریقی با یک فشار تغییرشکل دهنده وارد میشود (PMM در چنین شرایطی هدایت میگردد) (این مهم است که پیپت به طرف جنین در این روش فشار داده نمیشود )

سیستم (Piezo) PMM  قادر به انجام کارهایی است که سیستمهای لیزری نمی توانند انجام دهند .

برای محدود کردن آسیب وارده به اوویست در هنگام تزریق روشهای مانیپولاسیون متنوعی توسعه یافته اند .تکنیک PMM یکی از این روشهاست ، ICSI , ICSI-PIEZO لیزر با توجه به کاهش میزان آسیب فیزیکی مورد مقایسه قرار گرفته اند .

مقایسه نفوذ به پرده های جنینی

نکته مربوط به عملکرد بر روی پرده های جنینی این است که چگونه تغییر شکل ایجاد شده در اوویست را کاهش دهیم . تفاوتهای اندکی در این زمینه بین تکنیک PMM و تکنیک لیزر وجود دارد .

 نفوذ به غشای پلاسمایی

برای ورود اسپرماتوزوئید  به داخل سلول اوویست لازم است که غشای پلاسمایی به صورت کامل شکسته شود .

اگر غشای پلاسمایی به صورت خشن بریده شود اوویست بلافاصله میمیرد .

در یک کلام میتوان گفت روشی که طی آن میکرو پیپت به درون غشای پلاسمایی نفوذ میکند مستقیما به نتیجه آزمایش ارتباط دارد و در این زمینه سیستم PIEZO یک برتری قطعی و مسلم در عملکرد دارد .

● مقایسه بین تکنیک piezo و تکنیک laser

► تکنیک piezo

غشای پلاسمایی به اندازه کافی با فشار میکرو پیپت در مقابل اوویست توسیع می یابد . در نتیجه نفوذ از طریق غشای پلاسمایی با حداقل نیاز مندی امکانپذیر میگردد .

در ICSI نفوذ به درون غشای پلاسمایی مهمتر از نفوذ به پرده های جنینی است . در این تکنیک میکرو پیپت به آرامی و بدون تخریب اوویست به درون غشای پلاسمایی وارد میشود .

► تکنیک laser

شکستن غشای پلاسمایی با اشعه لیزر دارای خطر برای اوویست است . به علت تمرکز اشعه لیزر دمای اوویست به حد بالایی میرسد و این نگرانی وجود دارد که به اوویست آسیب جدی وارد شود ، بنابراین لازم است که غشای پلاسمایی به درون میکروپیپت کشیده شود ، اگر چه این کار نیز به اوویست آسیب جدی وارد میکند و علاوه بر این انجام  این کار نتایج خوبی روی نمونه های موش ندارد .هنگامی که پرده های جنینی با این روش سوراخ میشوند غشای پلاسمایی ممکن است دچار آسیب جدی شود که ممکن است در نفوذ میکرو پیپت در غشای پلاسمایی اثرات جدی داشته باشد .

در یک کلام میتوان گفت که روش laser icsi  یک روش مناسب برای سوراخ کردن پرده های جنینی نیست .

● مشخصات Hatching به واسطه piezo  (PAHI)

همانطور که میدانید PZD ، باز کردن زونا و تاینینگ زونا در روش هچینگ مورد استفاده قرار میگیرند .

اگر شما از pmm استفاده میکنید میتوانید از این تکنیکها برای وارد کردن یک جنین به سرعت و با ایمنی بالا استفاده کنید .

ما مشخصات PAH را به طور خلاصه بیان میکنیم .

نکته : تکنیک آسان : اگر بخواهیم PAH را به طور خلاصه بیان کنیم برداشتن پرده های زونا می باشد .یک پیپت برای ایجاد لرزه در این روش مورد نیاز است .

آداپتور (CHO-1/CHO-2) برای PAH در قسمت مربوطه نصب میگردد .

تنظیم شدت و تنظیم سرعت PMM بزرگی و فرکانس لرزشها را در پیپت تعیین میکند .

تکنو لوژی میکرو مانیپولاسیون از زمانی که دانشمندان سعی در باز کردن اسرار دانش زندگی پس از ژنومی داشته اند اهمیت بیشتری پیدا کرده است .

با توجه به این موضوع محققین در تمام جهان در حال بهره گیری از نیروی انتقال از طریق تزریق داخل سیتو پلاسمی اسپرم (ICSI) و ترانس ژنی متا فاز 2 هستند .

سیستم میکرو مانیپولاسیون PIEZO  (PMM)  که توسط کمپانی PRIME TECH  توسعه یافته است قلب این انقلاب است .

سیستم PIEZO بر افزایش سرعت ، نیرو  و دقت میکرو مانیپولاسیون تاثیر میگذارد .

PMM به محققین اجازه میدهد تا سوزنهایی با نوکهای قطر 1 μm  تا  25 μm  را برای میکرو مانیپولاسیون سلولی و دقت سلولی انتخاب نمایند .

سیستم PIEZO  کمپانی PRIME TECH و تولیدات مکمل آن توسط بهترین محققین در سطح جهانی مورد استفاده قرار میگیرد که شامل تولید پستانداران ترانس ژنیک و کلون شده است .

ما معمولا در میکرو پیپتهای با نوک مسطح برای روش PMM در سلولهای پستانداران استفاده میکنیم .

پیپتهای دارای نوک مسطح به طور موثری نیرو را به نمونه انتقال میدهند ، در شکل زیر تصویر میکرو پیپتی که برای سیستم PMM  مناسب است نشان داده شده است .

PMM  سیستمی است که نیروی PIEZO  را به نوک میکرو پیپت انتقال میدهد .

نگهدارنده پیپت در پایه این قسمت نفوذ کرده و نیروی PIEZO به نوک میکرو پیپت انتقال میابد .

نکته : نقطه خمش و میزان خمش میکرو پیپت :

به طور معمول نوک میکرو پیپت باید در حدود 100  میکرومتر خم شود چون به صورت موازی در میدان میکروسکوپ قرار میگیرد و فوکوس کردن میکروسکوپ روی پیپت آسانتر است .موقعیت پیپت ورودی در این شکل به جزئیات نشان داده شده است

اگر چه داشتن زاویه بزرگ خمش باعث می شود تاثیر سیستم PIEZO  دچار اشکال شود ما پیشنهاد میکنیم که زاویه خمش بین 1 تا 20 درجه باشد .